"Якщо наші початкові результати можуть бути повторені в інших лабораторіях, вони змінить те, як ми зараз думаємо про причини хвороби Альцгеймера", - каже доктор Рамон Труллас, професор з вищої ради з наукових досліджень (CSIC ) в Інституті біомедичних досліджень Барселони та провідний автор дослідження. На його думку, це відкриття може дозволити пошук більш ефективних методів лікування на доклінічній фазі.
В даний час єдиним способом точного діагностування захворювання є посмертний невропатологічний аналіз. Зв’язок між відомими біомаркерами з недугою неясний, тому діагностувати доклінічні стадії з реальною достовірністю майже неможливо.
У своїх роботах дослідники CSIC показують, що зниження вмісту ДНК мітохондрій (мтДНК) у КСФ може бути доклінічним показником хвороби Альцгеймера; з іншого боку, що може бути прямий причинний зв’язок. Гіпотеза полягає в тому, що зниження рівня ДНК мітохондрій у ЦНС відображає зниження здатності мітохондрій живити нейрони мозку, що спричиняє їх загибель.
Зниження концентрації мтДНК передує появі відомих біохімічних біомаркерів Альцгеймера (бета-амілоїд 1-42, білки Т-тау та р-тау), що говорить про патофізіологічний процес хвороби Альцгеймера. Він починається раніше, ніж вважалося раніше, і його виснаження в мтДНК може бути одним з перших прогнозів захворювання.
Окрім того, що дозволяє дослідити можливий причинний зв’язок мтДНК та прогресування хвороби Альцгеймера, використання мтДНК як показника доклінічної хвороби Альцгеймера забезпечує важливу перевагу перед попередніми біохімічними маркерами: виявлення цього нового біомаркеру нуклеїнової кислоти У ньому відсутні технічні труднощі, пов'язані з виявленням білка. МтДНК можна легко оцінити за допомогою кількісної чи ПЛР у режимі реального часу (qPCR) або «Доплет-цифрової ПЛР» (ddPCR).
До цього дослідження дослідники не повідомляли, що вільні клітини, що циркулюють в мтДНК, можуть бути виявлені в людському КСФ. Однак за допомогою цього дослідження команда доктора Трулласа змогла кількісно виявити та відтворити мтДНК за допомогою qPCR, ретельно оптимізованого шляхом дотримання інструкцій MIQE.
Абсолютна кількісна оцінка молекул-мішеней
Щоб підтвердити свої результати за допомогою qPCR, вчені застосували цифрову ПЛР-систему QX100 Digital PCR від Bio-Rad Laboratories. На відміну від аналізів qPCR, система QX100 забезпечує абсолютне кількісне визначення цільових молекул ДНК без необхідності стандартної кривої. Важливим фактором аналізу CSF було те, що система «Doplet Digital PCR» не потребує очищення зразка для видалення інгібіторів ПЛР, як це необхідно для аналізів qPCR.
"Doplet Digital PCR" дозволив нам підтвердити початкові вимірювання qPCR, оскільки він забезпечує абсолютне кількісне визначення на рівні однієї молекули, не покладаючись на стандартну криву ", - пояснює Труллас. "Коли технологія набуває більш широкого поширення, ми передбачаємо, що DDPCR стане майбутнім виявлення ДНК мітохондрій у спинномозковій рідині", - додає він.
Доктор Труллас сподівається, що інші лабораторії та лікарні успішно повторять результати досліджень його групи, які підтвердили б, що знижений рівень мтДНК слід досліджувати як можливу причину хвороби Альцгеймера. Знайшовши спосіб блокувати цю дегенерацію, лікарі можуть мати можливість діагностувати та лікувати хворобу Альцгеймера до появи симптомів.
Джерело: www.DiarioSalud.net
